效液相色谱仪器操作规程

一、准备工作：

1、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常；

2、 根据检测样品需要更换合适的色谱柱（色谱柱上标示的箭头方向与流动相的走向一致）；

3、准备所需用流动相，用0.45μm滤膜过滤；

4、观察流动相是否充足，满足当天工作使用，一般应在预计使用量上加150 mL；

5、 流动相要新鲜配制，一般情况下在48h内使用完，超过此时间需重新抽滤或超声波脱气。

6、制备样品溶液，必须用0.45μm滤膜过滤。

二、操作规程：

1、依次打开仪器电源、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站；

2、 检查仪器显示内容是否正常，例如，氘灯是否点亮，开泵后泵压是否过高等，如有异常应先排除；

3、 根据待测样品更换合适的流动相，设置合适的检测波长、流速；

4、 逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀；

5、 启动泵，待检查流量稳定，无气泡后，将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。若管路中仍有气泡，则重复以上操作至气泡排尽；

6、 平衡系统，启动泵后，检查各管路连接处是否漏液；观察泵控制屏上的压力值，压力波动不超过0.5 MPa；观察基线变化，基线基本平直即可进样；

7、 进样，用平头液相色谱针吸取定量样品溶液，将进样阀逆时针旋至Load档，进样针从进样孔处水平推入，样品溶液推入样品环后，立即将进样阀顺时针旋至Inject位置，开启数据采集；

8、 数据处理，根据色谱工作站的使用方法，处理所测样品的色谱图，记录所测样品的检测结果；

9、 关机，停止使用前，用纯有机相冲系统30min后可关闭检测器、输液泵；

10、 记录，认真填写样品检验记录和仪器使用记录。

三、注意事项

 1、流动相必须用HPLC级的试剂，使用前用0.45μm滤膜过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质；
  2、流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用；
   3、不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液；
   4、长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉；
   5、每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器；